1 原理及適用范圍
阪崎腸桿菌(Enterobacter sakazakii)存在于腸道中,在一定條件下可引起人和動(dòng)物致病。能引起新生兒腦膜炎、致死性小腸結(jié)腸炎和菌血癥等疾病,且伴隨有嚴(yán)重的神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥、發(fā)育障礙等癥狀,引起的死亡率高達(dá)50%以上。新生兒阪崎腸桿菌感染與嬰兒配方奶粉密切相關(guān),奶粉中微量的阪崎腸桿菌污染也能導(dǎo)致感染的發(fā)生。阪崎腸桿菌檢測(cè)板是一種預(yù)先制備好的一次性培養(yǎng)基產(chǎn)品,由阪崎腸桿菌選擇性培養(yǎng)基、吸水凝膠和特異性酶顯色劑等組成,一步培養(yǎng)15~24 h就可確定出病原菌的存在,大大地簡(jiǎn)化了檢測(cè)程序,更加適合各級(jí)檢驗(yàn)部門(mén)和食品生產(chǎn)企業(yè)使用。執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn):中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 阪崎腸桿菌檢驗(yàn)》(GB 4789.40)。
2 阪崎腸桿菌檢測(cè)板 操作方法
2.1 樣品處理:取樣品 25 mL(g)放入含有225 mL滅菌生理鹽水的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi),制成1:10的樣品勻液。根據(jù)樣品污染程度及檢驗(yàn)需要,可進(jìn)一步制成10倍遞增的樣品稀釋液。(對(duì)比測(cè)試片,取樣更少,無(wú)需增菌培養(yǎng))
2.2 接種:將阪崎腸桿菌檢測(cè)板上層膜不干膠標(biāo)簽部分揭開(kāi),用無(wú)菌吸管吸取1 mL樣品勻液均勻地滴加到紙片上,迅速貼好上層膜并水平晃動(dòng)檢測(cè)板,使樣品勻液均勻吸附在濾紙上,靜置10 s左右,待樣品勻液*被吸附在濾紙上。每個(gè)樣品接種兩片。
2.3 培養(yǎng):將檢測(cè)板疊在一起,倒置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),36℃±1℃,培養(yǎng)15~24 h。
3 阪崎腸桿菌檢測(cè)板結(jié)果判讀
呈藍(lán)綠色的菌落為阪崎腸桿菌。出現(xiàn)陽(yáng)性菌落的樣本,用其他更為可靠的方法進(jìn)行驗(yàn)證,或者至少再取樣重復(fù)檢驗(yàn)一次。
4 結(jié)果報(bào)告
報(bào)告樣品中檢出或未檢出阪崎腸桿菌。
5 附加說(shuō)明
注意使用過(guò)的檢測(cè)板上帶有活菌,需及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理 。
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